液相色譜柱保護(hù)柱分類及選擇：
從材質(zhì)上分：不銹鋼材質(zhì)和PEEK（聚醚醚酮）材質(zhì)
PEEK 材質(zhì)優(yōu)缺點(diǎn)——樣品對金屬離子比較敏感時(shí)，選擇PEEK材質(zhì)比較合適，比如某些蛋白分析會(huì)用到PEEK材質(zhì)的分析柱，主要就是考慮到這方面的因素；
不銹鋼材質(zhì)優(yōu)缺點(diǎn)——大部分小分子化合物的分析，選擇不銹鋼材質(zhì)保護(hù)柱居多，特別是當(dāng)流動(dòng)相體系使用到四氫呋喃（THF）或DMSO等一些溶解性較強(qiáng)的溶劑時(shí)，必須選擇不銹鋼材質(zhì)，甚至對于HPLC系統(tǒng)的管路也需要替換成不銹鋼材質(zhì)，因THF對于PEEK管路有相當(dāng)強(qiáng)的腐蝕作用。
從結(jié)構(gòu)上分：卡套式（柱芯+柱套）和直接填裝短柱
直接填裝短柱優(yōu)缺點(diǎn)——這種結(jié)構(gòu)的保護(hù)柱實(shí)質(zhì)就是短的色譜柱，一般填裝的填料跟分析柱填料完全一樣。生物樣品分析中，用這種類型保護(hù)柱居多，除可過濾一些不溶顆粒外，還可除去一些在分析柱上易吸附的雜質(zhì)。缺點(diǎn)是，一次性使用，污染嚴(yán)重時(shí)，只能報(bào)廢。
卡套式保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)——卡套式保護(hù)柱的柱套可反復(fù)使用，柱芯污染后可替換，廠家會(huì)提供配套的保護(hù)柱芯，但購買時(shí)需要注意，柱芯中有與分析柱匹配的填料，需要確認(rèn)柱芯中的填料類型再購買。同時(shí)，柱芯和柱套需是來源于同一廠家的同一規(guī)格，否則，會(huì)存在匹配上的差異，導(dǎo)致峰型異?；蛘呗┮?。
從連接方式上分：獨(dú)立式和直連式
獨(dú)立式液相色譜柱保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)
保護(hù)柱和分析柱之間用一段管路連接，不用擔(dān)心與分析柱在連接上的匹配問題。但使用管路連接時(shí)，連接不當(dāng)容易產(chǎn)生死體積。
直連式保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)——保護(hù)柱接口帶螺紋，可直接與分析柱連接，死體積小，UPLC分析時(shí)建議選擇直連式保護(hù)柱；缺點(diǎn)：購買時(shí)需保證接口與分析柱匹配。
液相色譜柱保護(hù)柱選擇考慮以下幾方面因素：
1. 除非特殊情況，一般選擇填料基質(zhì)與分析柱基質(zhì)完全相同的保護(hù)柱。
2. 選擇保護(hù)柱尺寸可按柱體積計(jì)算，保護(hù)柱體積按分析柱體積的5%~10%即可；如4.6*250mm的分析柱體積約為4mL，保護(hù)柱體積可選擇在0.2~0.4mL之間為宜。同時(shí)，保護(hù)柱內(nèi)徑應(yīng)與分析柱內(nèi)徑相同或相當(dāng)。
液相色譜柱保護(hù)柱使用注意事項(xiàng)：
1. 獨(dú)立式保護(hù)柱與分析柱連接時(shí)，連接管路盡可能短，且接口切面平滑，盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。
2. 卡套式保護(hù)柱一般未標(biāo)注液流方向，使用時(shí)最好自行標(biāo)注，并按照標(biāo)注方向來使用，以免正反向使用后，截留的雜質(zhì)污染分析柱。
3. 直接填裝的短柱型保護(hù)柱，出現(xiàn)柱壓升高或峰型變差時(shí)，可不接分析柱進(jìn)行反向清洗，清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。
4. 卡套式保護(hù)柱，柱芯替換時(shí)，注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配，同時(shí)不易旋擰過緊，以防滑絲。
5. 保護(hù)柱或柱芯一般不建議超聲清洗，因可能對填料表面修飾有影響。
6. 如同一保護(hù)柱配不同的分析柱使用，每次使用前，保護(hù)柱需先清洗并用流動(dòng)相平衡保護(hù)柱一段時(shí)間后，再接分析柱使用。
保護(hù)柱與柱前過濾器的區(qū)別和使用：
使用保護(hù)柱的目的在于延長分析柱的使用壽命，當(dāng)分析柱造價(jià)昂貴時(shí)，保護(hù)柱的價(jià)值尤其能體現(xiàn)，某些情況下，當(dāng)使用的分析柱本身價(jià)格便宜，保護(hù)柱并非必選，推薦使用柱前過濾器更合適。
柱前過濾器與保護(hù)柱兩者外形相似，差異主要在于：保護(hù)柱內(nèi)芯裝有填料，而柱前過濾器內(nèi)芯是可更換的濾片（一般為帶孔的不銹鋼燒結(jié)板）
因此，從結(jié)構(gòu)可以推測使用上的差異：
柱前過濾器——通用性強(qiáng)，任何分析柱前都可使用，因其濾芯只起到過濾和截留雜質(zhì)的作用，濾片污染后可超聲清洗，反復(fù)使用。
保護(hù)柱——柱中填料除了起截留雜質(zhì)的作用外，也可除去樣品中易吸附的雜質(zhì)，這一點(diǎn)對生物樣品分析尤其重要。
發(fā)布于: 2023-05-22